大马蹄蝠体形甚大，前臂可达近100毫米，耳也大、三角形，毛长而细密，体色变化大，背色烟褐甚至黑褐，腹色灰褐，有些偏紫褐。
大马蹄蝠常数十或数百只生活在一起，也有的单只挂于顶壁，常与其他蝙蝠混居，同栖一洞的曾见有普氏蹄蝠、中菊头蝠、皮氏菊头蝠、鲁氏菊蝠、中华鼠耳蝠、毛腿鼠耳蝠、绒鼠耳蝠和折翼蝠等。大马蹄蝠11月冬眠，冬眠时多处在洞道深处，翌年2-3月开始活动，出眠后移于洞口附近，有的甚至在光度大、温度高的环境里。冬季不迁飞，1月上旬当洞口气温10℃时，它们双翅褶迭并列于体侧，洞内湿度大，毛上具水珠，受干扰后少数起飞。捕回喂水当水沾湿胸毛时，它们用左后肢倒挂，用右后趾瓜梳理胸毛，并将梳出的水，放入口中舔去，如此反复多次。
大马蹄蝠一般夏季夜间外出觅食飞翔于居民区、农田、林间上空，捕食昆虫，飞行较缓慢，其中尤以鳞翅目蛾类昆虫为主。
大马蹄蝠的繁殖期与栖息地有很大的关系。中国大马蹄蝠夏初繁殖，贵州贵定5月中旬已有临产的孕蝠，胎仔一枚居右侧子宫内；安龙和罗旬，6月中旬均见有外耳孔未开，眼未睁的幼体，体重13-14克，前臂长37-41毫米，胫长17毫米。在海南3月中旬已有孕蝠。据Medway（1987）记载马来西亚的大马蹄蝠1年繁殖2次，2-5月和9-10月均见孕蝠。
保护级别：列入《世界自然保护联盟濒危物种红色名录》（IUCN）2008年 ver 3.1——无危（LC）。
